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細(xì)胞培養(yǎng)箱的清潔和消毒

更新時(shí)間:2015-03-26點(diǎn)擊次數(shù):6789

1.   培養(yǎng)箱消毒:先用純水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就可以拉!注意周圍環(huán)境的清潔就不會(huì)那么容易污染的拉!


2.   我的經(jīng)驗(yàn)是在補(bǔ)充水時(shí)把水加熱一下,達(dá)到培養(yǎng)箱的溫度。


3.   這么早就養(yǎng)細(xì)胞了,我們這里一般是用70%的乙醇擦洗,然后再用0.1%的新潔爾滅擦洗,不放心的話再用高錳酸鉀加甲醛1:1比例熏一遍。注意要是熏的話千萬注意混合之后馬上離開,然后密閉細(xì)胞培養(yǎng)室,味道很刺激的。在養(yǎng)細(xì)胞前消毒,否則,確實(shí)沒地方放細(xì)胞。


4.   我們的方法比較簡(jiǎn)單,先用75%酒精擦拭內(nèi)壁,通風(fēng)10分鐘,紫外線照射30分鐘即可。


5.   我們的通常處理是先用75%的酒精擦拭內(nèi)壁,然后用甲醛+高錳酸鉀熏蒸一個(gè)晚上,然后通風(fēng)一整天(同時(shí)打開紫外線照射)。


6.   我們是把培養(yǎng)箱里的板層拿出來高壓一下,箱壁用75%酒精擦一遍,換用詩樂氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好,其他的請(qǐng)高手指教。


7.   熏蒸后吹一天是不夠的,zui起碼要一個(gè)星期才可以讓甲醛散盡,要不細(xì)胞長(zhǎng)不好的


8.   有的培養(yǎng)箱能加熱內(nèi)壁到90度,也有的帶有紫外線功能。常規(guī)應(yīng)該每周用酒精擦洗內(nèi)部一次。具體的操作請(qǐng)參考培養(yǎng)箱的手冊(cè),或著咨詢培養(yǎng)箱。使用消毒劑應(yīng)小心,培養(yǎng)箱內(nèi)有檢測(cè)溫度、濕度和二氧化碳濃度的傳感器,腐蝕性消毒劑或有機(jī)溶劑有可能損壞某些器件,請(qǐng)慎用。另外,揮發(fā)性的甲醛有毒,易燃、易爆。如果在培養(yǎng)箱內(nèi)殘留甲醛的話,細(xì)胞會(huì)死光光哦(我實(shí)驗(yàn)室的真實(shí)故事)??傊?,先看培養(yǎng)箱手冊(cè),再,方可*啊。


9.   常規(guī)什么也不放!硫酸銅的作用是抑制細(xì)菌生長(zhǎng)(但多數(shù)用在處理污染的孔板)。因?yàn)楝F(xiàn)在的孵箱都有抑菌功能。


10.   我們實(shí)驗(yàn)室的做法:把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺(tái)內(nèi)加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水.再加少量新潔爾滅,濃度沒關(guān)系.細(xì)胞養(yǎng)的都可以.


11.   我建議

1 先把培養(yǎng)箱*消毒.具體方法也是用75%的酒精好好清洗培養(yǎng)箱.

2,操作時(shí)嚴(yán)格按照無菌操作的原則

3 我認(rèn)為雙抗的更換問題倒是不大,除非你正在使用的是污染的抗生素.

4 盡量減少觀看細(xì)胞的次數(shù)及時(shí)間.


12.   我們實(shí)驗(yàn)室清潔培養(yǎng)箱的方法:用洗衣粉或洗潔精洗一遍——清水沖凈——84消毒液洗——清水沖凈——75%酒精擦洗一遍


13.   這是我們實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的培養(yǎng)箱消毒方法(一般一個(gè)月一次),希望對(duì)你會(huì)有用


14.   首先把培養(yǎng)箱里的東西全部取出,放盡培養(yǎng)箱里的三蒸水;反復(fù)用三蒸水沖洗培養(yǎng)箱,然后用75%酒精擦3遍,之后再用三蒸水擦3遍;培養(yǎng)箱里的架子先用自來水反復(fù)沖洗,然后用蒸餾水、三蒸水、75%酒精各擦3次,于紫外下照射消毒1 h左右;zui后將三蒸水(里面應(yīng)加少許染料)加入培養(yǎng)箱,將消毒好的架子放入即


15.   培養(yǎng)箱應(yīng)放置無菌室,水中應(yīng)加適量的疊氮鈉(防腐)或者硫酸銅,注意空氣消毒.


16.   消毒培養(yǎng)箱的常用方法有兩種:

把細(xì)胞移出,記住擰緊瓶蓋,通常放在超凈臺(tái)內(nèi),室溫一兩個(gè)小時(shí),問題不大。如培養(yǎng)室有空調(diào),也可將空調(diào)打開。然后先用75%酒精棉球擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁,注意不要漏掉任何一個(gè)角落。擦拭兩遍后用一蒸水或二蒸水清洗內(nèi)壁,可多清洗幾遍。zui后用消過毒的棉球或75%酒精棉球把內(nèi)壁再擦拭一遍即可。整個(gè)操作沒有必要在無菌條件下。zui后可在培養(yǎng)箱的水里加上亞甲基藍(lán),混勻即可。亞甲基藍(lán)溶液可起到一定的抑菌殺菌作用。待培養(yǎng)箱內(nèi)酒精幾乎揮發(fā)完時(shí),將細(xì)胞放入培養(yǎng)箱中。

還有一種辦法就是直接用蒸餾水清洗完,然后再用紫外燈照(是那種培養(yǎng)箱里就帶有紫外燈的,就方便多了。)

通常培養(yǎng)箱是需要定期清洗的,我們室是1-2月清洗一次,當(dāng)然這要根據(jù)細(xì)胞養(yǎng)的多少和培養(yǎng)箱使用的頻繁程度來決定的。


17.   我們實(shí)驗(yàn)室液發(fā)生過類似事件,我把我們處理過程告訴你,希望對(duì)你有幫助:

首先消毒培養(yǎng)箱,如果你們有兩個(gè)或以上培養(yǎng)箱就好辦了,如果只有一個(gè)且還有很多其他細(xì)胞就麻煩點(diǎn)。只能暫時(shí)的放在超凈臺(tái)上。具體如下,中午將空調(diào)溫度打到zui高(也只有31度),超凈臺(tái)開紫外。下午早點(diǎn)來關(guān)紫外,將細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋蓋緊,轉(zhuǎn)到超凈臺(tái)內(nèi),用75%酒精擦洗培養(yǎng)箱,再用無臭氧型可移動(dòng)的紫外等照射半小時(shí),然后將細(xì)胞放回,松開蓋口即可(切記CO2瓶子閥門要關(guān)緊啊,不然氣全跑光了)。

一般實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)了霉菌的話,肯定要全部消毒。

再消毒實(shí)驗(yàn)室,先把室內(nèi)空調(diào)和消毒柜過濾網(wǎng)都拆下清洗,在錐形瓶?jī)?nèi)加點(diǎn)高錳酸鉀,放在實(shí)驗(yàn)室地上,然后倒入甲醛,立馬關(guān)門走人就可以了。

2天后再開門裝好東西,和往常一樣開始工作了。由于2天不能做事,個(gè)人細(xì)胞要先計(jì)劃好,大家都可以休息兩天。


18.   我們實(shí)驗(yàn)室是將細(xì)胞全部取出,酒精擦洗培養(yǎng)相,然后用紫外線照射4小時(shí)以上,污染細(xì)胞全部丟掉。還有就是培養(yǎng)室也采用紫外線消毒


19.   我也碰過這個(gè)情況,是自己的基礎(chǔ)培養(yǎng)基污染了,光鏡下面可以看見瓶底有細(xì)細(xì)的黑色小顆粒,但具體原因不詳。處理方法:

1、被污染的細(xì)胞全部照過紫外線2小時(shí)以上后扔掉;

2、同一批的培養(yǎng)基、使用的細(xì)胞清洗液等等全部重新濾過消毒(有點(diǎn)舍不得全部扔掉,就嘗試了一下,結(jié)果證明是可以的);

3、打開培養(yǎng)箱,用75%酒精擦洗,然后用新潔爾滅擦洗(此步驟我們重復(fù)了2次,隔天),用紫外照射4小時(shí)以上;

4、清掃培養(yǎng)室,紫外照4小時(shí)以上,重復(fù)一次;

后來就沒有啦。:)如果污染嚴(yán)重的話,那就要重復(fù)重復(fù)再重復(fù)了。


20.   偶也在年前遇到兩次大爆發(fā),先是真菌后是細(xì)菌。搞得我對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)都快失去信心了,我養(yǎng)細(xì)胞都一年半了,平時(shí)細(xì)胞沒什么,感覺養(yǎng)細(xì)胞是很簡(jiǎn)單的事,可是當(dāng)污染大爆發(fā)時(shí)真的有招架不住的感覺。記得當(dāng)時(shí)丟掉了幾乎所有的細(xì)胞,近一百瓶,就只剩下保種的三兩瓶,寒?。?!至于處理方法,也就是乳酸熏蒸(記得把培養(yǎng)箱及超凈臺(tái)打開)之后一周關(guān)門關(guān)窗,不再進(jìn)培養(yǎng)室,一周后75%酒精做*滅菌,也就是用酒精搽培養(yǎng)箱及培養(yǎng)室里的所有平面,甚至包括地面。到現(xiàn)在有四個(gè)月了,偶的細(xì)胞一直很好。建議不要驚慌,所謂兵來將擋,水來土掩。呵呵呵,一切會(huì)好起來的。


21.   看來你要大動(dòng)干戈了。首先考慮培養(yǎng)基的問題??梢詥为?dú)放置一瓶培養(yǎng)基到其他的培養(yǎng)箱里培養(yǎng)24小時(shí)看看是不是培養(yǎng)基污染。不過建議還是全部扔掉重新配置比較好。其次考慮培養(yǎng)箱和培養(yǎng)室的問題?;旧蠎?yīng)該每一個(gè)月將培養(yǎng)箱*消毒一次的。首先用75%酒精擦洗,一般的培養(yǎng)箱都是可以拆卸的,將能拆卸的部分拆開擦洗后放到烤箱里烘烤(180度5個(gè)小時(shí))。剩下的培養(yǎng)箱里用戊二醛擦洗后用紫外燈反復(fù)照射。然后在要用培養(yǎng)箱培養(yǎng)室之前再用紫外燈照射消毒2小時(shí)。你的照片里顯示的應(yīng)該是細(xì)菌污染,咳比較好對(duì)付。


22.   設(shè)置5%,卻顯示5.1%(當(dāng)然這點(diǎn)差距實(shí)在不算太大,至于顯示HIGH CO2,那是可以自己設(shè)定的,你可以自己設(shè)定二氧化碳濃度達(dá)到多少時(shí)報(bào)警(也即顯示HIGH CO2,同時(shí)可能發(fā)出警鳴音,如果你沒有按MUTE按鈕或同等設(shè)置),同樣地,你可以設(shè)置下限,還有溫度的上下限),培養(yǎng)箱溫度升高時(shí)CO2濃度會(huì)增加,反之亦然。檢查一下你的CO2減壓閥上面顯示的壓力指示是否超過0.08MPa,長(zhǎng)期過高的CO2壓力容易損壞培養(yǎng)箱內(nèi)CO2壓力調(diào)節(jié)模塊,那樣需要很多銀子修理的。如果情況進(jìn)一步惡化,建議售后服務(wù)。


23.   手提式紫外燈


24.   1)一個(gè)大原則是:細(xì)菌和細(xì)胞體系是*不同的,絕不可以放在一起,一般實(shí)驗(yàn)室均設(shè)置細(xì)菌間、細(xì)胞間,嚴(yán)格的分開是成功培養(yǎng)細(xì)胞的保證。

2)關(guān)于CO2培養(yǎng)箱的清潔工作,應(yīng)該說不難。由于為不銹鋼材,你用0.1%新潔爾滅擦洗干凈后,在用2%的CuSO4清洗(清霉菌,在CO2條件下霉菌很易生/),用70%乙醇噴霧消毒箱內(nèi)空氣。再?zèng)龈珊?,再底部再?%CuSO4(水稍出現(xiàn)蘭色即可)的滅菌水進(jìn)行穩(wěn)定培養(yǎng)箱,待培養(yǎng)箱溫度和濕度穩(wěn)定后,再用一瓶細(xì)胞預(yù)實(shí)驗(yàn)一下,培養(yǎng)2-3天,沒有問題再進(jìn)行培養(yǎng)。


25.   有的培養(yǎng)箱可以直接高溫干烤滅菌的,或者有的金屬架可以干烤


26.   底部水盤加入蒸餾水后見到一片一片的東西,很可能是細(xì)菌群落的生長(zhǎng)!個(gè)人經(jīng)驗(yàn)是,必須清洗,而且是*清洗干凈!拆開支架和每層的托盤,包括水盤(注意拆卸先向技術(shù)員了解內(nèi)部結(jié)構(gòu),以防誤拆損壞),用碘伏棉球?qū)⑴囵B(yǎng)箱里里外外和拆出來的部件拭擦2次,然后再用酒精將殘留碘伏拭去。下一步是,打開培養(yǎng)箱的門,開紫外照射一晚,這樣就可放心了。我剛回來就是如此弄的,培養(yǎng)的細(xì)胞并沒有感染跡象,活力甚佳,供參考!祝你好運(yùn)!


27.   我使用的方法是:

1 取下培養(yǎng)箱內(nèi)的隔板及掛鉤,用清水清洗干凈后,75%酒精*擦洗消毒,然后120度烤箱,考1小時(shí)。

2,培養(yǎng)箱用清水擦洗干凈后用75%酒精*擦洗消毒

3,帶無菌手套,安裝好培養(yǎng)箱內(nèi)的隔板及掛鉤

4,打開培養(yǎng)箱紫外燈照射30分鐘

5,高壓蒸餾水后加入

我們一直就是這樣做的,效果很好,可以試試看啊。


28.   補(bǔ)充一個(gè)水盤消毒的法子∶清水清洗干凈,75%酒精*擦洗消毒后,多弄些酒精上去,點(diǎn)火燒一下.效果杠杠的??!


29.   把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺(tái)內(nèi)加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水.再加少量新潔爾滅,濃度沒關(guān)系


30.   水套式,氣套式二氧化碳培養(yǎng)箱。


31.   細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境要求有一定濕度,必須加水!我的小經(jīng)驗(yàn)是: 1、雙蒸水裝在5L瓶中,2、高溫滅菌,3、移進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,在紫外照射下冷卻,4、6小時(shí)后,在加入培養(yǎng)箱中使用。

如果發(fā)現(xiàn)托盤中的說有白色漂浮物存在是,盡量吸干?。ù宋锟紤]是霉菌污染);

還有如果有條件,就是定期75%酒精大清潔!我一般2個(gè)月清潔一次?。ò?xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室)

這樣在無菌操作下,基本保證你免除污染??!


32.   培養(yǎng)箱內(nèi)不加水是不正規(guī)的,因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境要求有一定濕度。

我們培養(yǎng)細(xì)胞不僅經(jīng)常保持有水,而且培養(yǎng)液中不加任何抗生素。只要無菌操作過關(guān),不會(huì)發(fā)生細(xì)菌污染。


33.   我們實(shí)驗(yàn)室平常培養(yǎng)箱的消毒方法:(清潔前開紫外30分鐘)

1、隔板的清潔:先將隔板卸下,用干凈紗布沾新潔而滅擦兩遍;

2、箱內(nèi)壁用新潔而滅擦拭后再噴75%酒精,關(guān)門熏蒸15分鐘;

3、盛蒸餾水的盤子:把盤里的水倒掉,用新潔而滅擦拭,干后倒入三蒸水;

4、裝好板后,再噴75%酒精關(guān)門熏蒸30分鐘。

5、培養(yǎng)室開紫外照30分鐘以上。


34.   我們實(shí)驗(yàn)室是將全部隔板卸下,新潔而滅擦拭,放在超凈工作臺(tái)內(nèi)紫外殺菌,CO2孵箱內(nèi)用紫外燈照射12h以上。


35.   推薦方法:拆卸隔板,新潔兒滅搽3次,然后酒精搽3次,紫外下面照2小時(shí),然后裝上隔板,箱壁同樣處理,打開箱子,用小紫外燈或房間紫外燈照2小時(shí)。注意要搽頂部的螺旋槳。裝好后,噴酒精即可。另外,還是用用硫酸銅比較好,飽和溶液放置在箱子底部。屢試屢爽,大約可以管3-4個(gè)月沒有問題。如有效,請(qǐng)斑竹加分,謝謝!


36.   加硫酸銅的目的是為了防止真菌的生長(zhǎng),但硫酸銅容易改變孵箱pH值,所以建議不加硫酸銅,直接加蒸餾水即可,保持孵箱濕度.


37.   前一段時(shí)間培養(yǎng)箱里老是有散在的細(xì)胞霉菌污染。培養(yǎng)箱高溫消毒后,現(xiàn)在打開,發(fā)現(xiàn)里面那扇玻璃門和墊圈會(huì)有大量水汽,培養(yǎng)瓶外壁也有。請(qǐng)問是怎么回事?細(xì)胞還能養(yǎng)嗎?是因?yàn)榕囵B(yǎng)箱門的加熱故障或設(shè)置錯(cuò)誤,導(dǎo)致門的溫度與箱內(nèi)溫度不一樣,所以引起玻璃門結(jié)水汽。對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)沒多大的影響,因?yàn)橄鋬?nèi)的溫度是正常的。


38.   這種情況很常見,可以用以下方法解決:往水盤里的水加入適量的硫酸銅,攪拌均勻即可,因?yàn)榱蛩徙~是重金屬鹽,可以達(dá)到殺菌效果;另外也可以加10%的新吉爾滅等無刺激性的消毒物質(zhì)。注意,千萬不能直接往水盤里加自來水,因?yàn)樽詠硭镉泻芏酀撛诘拿咕龋坏l件溫和它們就會(huì)迅速繁殖,是用煮開的蒸餾水。注意了這些細(xì)節(jié),問題就迎刃而解了

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